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科研進展

2025年04月28日
中國金宝搏入口188在利用液滴微流控技術實現生物單分子回收方面取得進展

188bet足球將毛細管流式(shi)(shi)數字液滴PCR技術融入流式(shi)(shi)細胞儀,成功(gong)實現了DNA/RNA單分(fen)(fen)子(zi)高效檢測(ce)與(yu)回收,為靶向(xiang)藥物(wu)海選aptamer靶向(xiang)分(fen)(fen)子(zi)建(jian)立了通量(liang)最高的技術方案。研究成果以“Droplet digital PCR-based single aptamer selection”為題發表在(zai)國際著(zhu)名(ming)分(fen)(fen)析化學期(qi)刊(kan)Talanta。

圖1 液(ye)滴數字PCR與(yu)流(liu)式細胞儀的(de)聯合(he)工作(zuo)系統

液滴(di)(di)微流(liu)控在(zai)微米尺度(du)的(de)(de)(de)(de)通道(dao)內生成(cheng)、操控和分(fen)析(xi)納升(sheng)乃至飛升(sheng)液滴(di)(di)的(de)(de)(de)(de)技(ji)(ji)術(shu),我(wo)(wo)校基于(yu)(yu)該技(ji)(ji)術(shu)實現(xian)了(le)基于(yu)(yu)毛細(xi)(xi)管流(liu)式的(de)(de)(de)(de)單分(fen)子(zi)(zi)(zi)檢(jian)測[1](2018)、基于(yu)(yu)Dean流(liu)聚(ju)焦的(de)(de)(de)(de)單細(xi)(xi)胞分(fen)析(xi)[2](2019)。流(liu)式細(xi)(xi)胞儀是目前(qian)通量最高的(de)(de)(de)(de)單細(xi)(xi)胞分(fen)選(xuan)方法(fa),經過(guo)多年努力,我(wo)(wo)校成(cheng)功地(di)將ddPCR技(ji)(ji)術(shu)通過(guo)雙(shuang)乳化技(ji)(ji)術(shu)融入流(liu)式細(xi)(xi)胞儀(圖1),然(ran)后采用(yong)熒光增強術(shu)以及配置新的(de)(de)(de)(de)流(liu)式細(xi)(xi)胞儀鞘液,實現(xian)了(le)高通量單分(fen)子(zi)(zi)(zi)擴(kuo)增、檢(jian)測、篩(shai)選(xuan)一體化運行(xing)模式,并以黃(huang)曲(qu)霉素為(wei)例(li),一次性完成(cheng)了(le)無(wu)需測序(xu)(xu)的(de)(de)(de)(de)aptamer靶向分(fen)子(zi)(zi)(zi)篩(shai)選(xuan)與(yu)回(hui)收[1](圖2)。與(yu)現(xian)有(you)基于(yu)(yu)測序(xu)(xu)的(de)(de)(de)(de)SELKEX方法(fa)相(xiang)比,本文方法(fa)不僅工(gong)作(zuo)快(kuai)速(su)而且正確率高,更(geng)為(wei)可(ke)(ke)貴的(de)(de)(de)(de)是能獲(huo)得靶向分(fen)子(zi)(zi)(zi)本身(shen)。按照SELEX慣例(li),在(zai)篩(shai)選(xuan)同時要不斷測量與(yu)分(fen)析(xi)序(xu)(xu)列(lie)、最后再根據序(xu)(xu)列(lie)合(he)成(cheng)靶向分(fen)子(zi)(zi)(zi);而本文獲(huo)得分(fen)子(zi)(zi)(zi)本身(shen)后,可(ke)(ke)直接用(yong)qPCR技(ji)(ji)術(shu)擴(kuo)增,從(cong)而獲(huo)得序(xu)(xu)列(lie)與(yu)二級結構都完全相(xiang)同的(de)(de)(de)(de)靶向分(fen)子(zi)(zi)(zi)。這(zhe)既減少了(le)大(da)量成(cheng)本,又(you)保留了(le)與(yu)親和力密切相(xiang)關的(de)(de)(de)(de)二級結構信息。研(yan)究團隊正在(zai)繼(ji)續(xu)攻關,研(yan)發基于(yu)(yu)水凝膠的(de)(de)(de)(de)第二代技(ji)(ji)術(shu),目標是操作(zuo)更(geng)為(wei)簡便,結果更(geng)加安全穩定。

論文第一作(zuo)(zuo)(zuo)者為(wei)熱科學和(he)能源工(gong)程系博士研究生吳澤(ze)銳,通訊(xun)作(zuo)(zuo)(zuo)者為(wei)188bet足球丁衛(wei)平(ping)副(fu)教(jiao)授(shou)、何立(li)群(qun)副(fu)教(jiao)授(shou)以及胡(hu)芃教(jiao)授(shou)。工(gong)作(zuo)(zuo)(zuo)受國家(jia)自然科學基金(jin)資助(31670866,31970754)。

圖2 基(ji)于(yu)液滴數(shu)字PCR與流(liu)式(shi)細(xi)胞儀的aptamer篩選流(liu)程

1)//doi.org/10.1016/j.talanta.2025.127924

2)//doi.org/10.1039/C7LC01160A

3)Dean Flow Assisted Single Cell and Bead Encapsulation for High Performance Single Cell Expression Profiling | ACS Sensors

(熱科學和能源工程(cheng)系、科研部)

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